Testovi na Lymeovu bolest - kako izgledaju i kolika je cijena testova na Lymeovu bolest

Testove na Lymeovu bolest treba provoditi svaki put kad se dogodi ugriz krpelja. Za početak dijagnoze morate pričekati nekoliko tjedana. Prije toga moguće je testirati krpelja koji nas je ugrizao kako bi se utvrdilo je li nositelj neke bolesti. Kakvo je testiranje na Lymeovu bolest i koja je cijena testova?

Testiranje na Lymeovu bolest (bakterijsku bolest koju prenose krpelji uzrokovanu Borrelia burgdorferi i njenim sortama) preporučuje se provesti što je ranije moguće nakon uboda krpelja.

U dijagnozi lajmske borelioze koriste se specifične dijagnostičke sheme koje se temelje prije svega na serološkim metodama.

Međutim, uzimajući u obzir složeni patomehanizam bolesti i ograničenja laboratorijskih metoda, Lymeova bolest može uzrokovati brojne dijagnostičke poteškoće.

Stoga je na tržištu sve više laboratorijskih ispitivanja koja bi mogla riješiti ovaj problem. Nažalost, većina njih nema potvrđenu dijagnostičku vrijednost i ne bi ih se trebalo koristiti u rutinskoj dijagnozi Lymeove bolesti.

Sadržaj:

1. Rano lokalna borelioza - laboratorijski testovi
2. Rano diseminirana Lymeova bolest - test za Lymeovu bolest
3. Kasna Lymeova bolest - koji testovi za otkrivanje Lymeove bolesti?
4. Lajmska borelioza - praćenje liječenja
5. Lajmska bolest - imunološki kompleksi u cirkulaciji
6. Lajmska bolest - test transformacije limfocita (LTT)
7. Lajmska bolest - CD57 test
8. Berlioz - ELFA i CLIA test
9. Lajmska bolest - pregled krpelja uklonjenog s kože

Rano lokalna borelioza - laboratorijski testovi

U ovoj fazi, nakon kontakta sa zaraženim krpeljem, dolazi do lokalne infekcije i tzv migracijski eritem (lat. erythema migrans), što je simptom karakterističan za Lymeovu bolest.

Prisutnost eritema na mjestu ugriza krpelja dovoljna je za utvrđivanje infekcije borelijom. Rani lokalni stadij Lymeove bolesti traje od nekoliko dana do otprilike 4 tjedna, a pacijent može razviti simptome slične gripi.

To je najraniji stupanj infekcije u kojem serološke metode (ELISA i Western blot), ispitivanje prisutnosti antitijela IgM i IgG, mogu dati lažno negativne rezultate. U ovoj fazi tzv serološki prozor, što je početno razdoblje infekcije kada tijelo još ne proizvodi antitijela protiv borelije.

Prva IgM antitijela pojavljuju se oko 2. tjedna bolesti, ali kod većine ljudi njihova se prisutnost otkriva tek nekoliko tjedana. U slučaju negativnog serološkog rezultata, test treba ponoviti otprilike 3-4 tjedna nakon infekcije.

Nacionalni zdravstveni fond nadoknađuje ELISA i Western blots, ali liječnik koji ih upućuje mora imati razloga da ih naredi. Privatno, ELISA test košta od 30 do 100 PLN, a Western blot od 80 do 200 PLN.

Molekularno PCR testiranje može se razmotriti u vrlo ranoj fazi infekcije. Metoda otkriva bakterijski genetski materijal (DNA) koji je najzastupljeniji u tjelesnim tekućinama u ranoj fazi infekcije. Što je duže vrijeme od infekcije, to je manja vjerojatnost otkrivanja bakterijske DNA.

Međutim, treba imati na umu da u Poljskoj još uvijek ne postoji standardizacija molekularnih metoda u dijagnozi Lajmske bolesti i stoga se ova metoda ne preporučuje kao dijagnostički alat. Nacionalni zdravstveni fond ne nadoknađuje molekularno testiranje i košta između 160 i 200 PLN.

Vrijedno znati

Faze infekcije Borrelia burgdorferi:

• rana lokalna Lymeova bolest
• rano diseminirana Lymeova bolest
• kasna borelioza

Pročitajte i: Eritem koji luta nakon uboda krpelja. Kako to prepoznati? Cjepivo protiv encefalitisa protiv krpelja

Rano širena Lymeova bolest - test za Lymeovu bolest

U fazi rano širene Lymeove bolesti zaraženi su mnogi organi, zglobovi, mišići, živčani sustav i kardiovaskularni sustav. Rana Lymeova bolest razvija se s glavoboljama, upalom facijalnog živca, umorom ili ukočenošću vrata. Ova faza traje oko nekoliko tjedana nakon infekcije.

U fazi rano diseminirane Lymeove bolesti uglavnom su prisutna protutijela IgM. U 6-8 tjedana nakon infekcije počinju se pojavljivati ​​i IgG antitijela. Stoga su serološke metode temelj dijagnostike u ovoj fazi infekcije.

Serološka dijagnoza lymske borelioze započinje fazom probira, tj. Izvođenjem osjetljivog ELISA testa.

Ako je rezultat negativan, znači da nisu otkrivene spirohete borelije ili je rezultat lažno negativan. Kada je rezultat pozitivan ili slabo pozitivan, treba izvršiti potvrdno Western blot testiranje, koje je vrlo specifično, kako bi se potvrdili rezultati ELISA metode.

Ako se sumnja na neuroboreliozu, može se provesti molekularno PCR testiranje iz cerebrospinalne tekućine. PCR metoda vrlo je osjetljiva, a s obzirom na to da je broj spiroheta borelije u cerebrospinalnoj tekućini mali, mogla bi biti korisna u postavljanju dijagnoze.

Međutim, bez prethodnih seroloških ispitivanja, to ne predstavlja dijagnozu infekcije.

Kasna Lymeova bolest - koji testovi za otkrivanje Lymeove bolesti?

Posljednja faza infekcije je kasna Lymeova bolest, kod koje dolazi do daljnjeg širenja bakterija na organe i stvaranja sve ozbiljnijih komplikacija infekcije. Pojavljuju se kasna Lymeova bolest, zglobna Lymeova bolest ili atrofični dermatitis. Kasna Lymeova bolest može trajati i nekoliko godina.

U ovoj fazi infekcije serološkim metodama otkrivaju se samo protutijela IgG. Visoke razine IgG protiv borelijskih spiroheta i komorbiditet simptoma ukazuju na lajmsku bolest. Međutim, u nekim slučajevima (posebno u ljudi koji su vrlo brzo primili antibiotsku terapiju u ranim fazama infekcije), IgM antitijela mogu postojati nekoliko godina. U takvim situacijama ta protutijela ne ukazuju na aktivnu infekciju.

Što je Lymeova bolest?

Lajmska borelioza - praćenje liječenja

Jedna od najvećih poteškoća u dijagnozi Lajmske bolesti je nedostatak osjetljivih i specifičnih laboratorijskih markera koji mogu procijeniti učinkovitost antibiotske terapije. Prema zadanim postavkama, promatranje simptoma bolesti koristi se za procjenu njegove učinkovitosti.

Istraživanja pokazuju da se određivanje razine protutijela IgM i IgG protiv antigena spirohete VLsE / C6 može koristiti za praćenje učinkovitosti infekcije borelijom.

Spiralni protein VlsE / C6 uzrokuje vrlo snažan i brz odgovor imunološkog sustava. Dodatak ovog antigena seru seroloških testova značajno povećava osjetljivost testa. Prisutnost IgG antitijela protiv proteina VLsE / C6 u bolesnika s Lymeovom bolešću je:

• 20-50% u bolesnika u ranoj fazi infekcije
  
  
• 70-90% u bolesnika s rano diseminiranom Lymeovom bolešću
  
  
• gotovo 100% u bolesnika s kasnom boreliozom

Nacionalni zdravstveni fond ne nadoknađuje pregled i košta između 80-150 PLN.

Lajmska bolest - imunološki kompleksi u cirkulaciji

Serološki testovi osnova su za dijagnozu Lajmske bolesti. Međutim, postoje kliničke situacije zbog kojih bi ovi testovi mogli biti lažno negativni. Jedna od njih je prisutnost tzv imuni kompleksi koji se sastoje od antigena borelije i specifičnih antitijela IgM ili IgG.

Imuni kompleksi blokiraju antitijela, što ih čini nemogućim za detekciju serološkim metodama, pa stoga mogu uzrokovati lažno negativne rezultate. Ovaj se problem javlja uglavnom kod vrlo intenzivnih infekcija.

Ako pacijent ima očite simptome Lymeove bolesti, a rezultati ispitivanja su negativni, neki laboratoriji nude test koji uključuje kemijsku razgradnju imunoloških kompleksa. Cilj ovog tretmana je oslobađanje protutijela i tek tada mjerenje njihove koncentracije.

Istraživanja pokazuju da upotreba takvog postupka prije serološkog ispitivanja može značajno povećati otkrivanje antitijela na antigene borelije. Međutim, ova se metoda ne koristi rutinski zbog nedostatka standardizacije u laboratorijima.

Cijena testa varira između 110-210 PLN (za IgM ili IgG antitijelo) i Nacionalni zdravstveni fond ne nadoknađuje.

Lajmska bolest - test transformacije limfocita (LTT)

Test transformacije limfocita (LTT) koristi se u raznim područjima medicine, uključujući u transplantologiji, alergologiji i posredno u dijagnozi spiroheta borelije. U dijagnozi Lymeove bolesti test utvrđuje prisutnost imunoloških stanica (T limfocita) u krvi pacijenta koje su bile u kontaktu s bakterijama. Test koristi ELISPOT tehniku, čiji je princip sličan ELISA metodi, ali je osjetljiviji od nje.

Neki ljudi navode da bi LTT testiranje na spirete Borrelia trebalo provesti kako bi:

• potvrda aktivne infekcije u ljudi s pozitivnim rezultatima seroloških testova, ali bez simptoma koji jasno ukazuju na bolest
  
  
• potvrda aktivne infekcije u osoba s negativnim ili graničnim serološkim testovima, ali s kliničkim simptomima bolesti
  
  
• praćenje infekcije nakon liječenja antibioticima
  
  
• procjena recidiva lajmske borelioze

Prema preporukama Radne skupine objavljenim 2014. godine, LTT test i određivanje razine antitijela u cirkulirajućim imunološkim kompleksima ne preporučuju se u dijagnozi Lymeove bolesti.

Ove metode još trebaju proći provjeru (tj. Potvrdu njihove pouzdanosti) kako bi bile korisno dijagnostičko sredstvo.

Cijena testa varira između 400-550 PLN i Nacionalni zdravstveni fond ga ne nadoknađuje.

Lajmska bolest - CD57 test

Oznaka površine CD57 protein je protein koji se javlja na površini stanica imunološkog sustava - Natural Killers (NK stanice).

Liječnici iz skupine ILADS, odnosno Međunarodnog društva za lajmsku bolest i srodne bolesti, smatraju da je u kroničnoj fazi lajmske bolesti imunološki sustav potisnut, što se odražava na smanjenju populacije NK stanica markerom CD57.

Oni pretpostavljaju da se mjerenjem njihovog broja u krvi može koristiti za procjenu aktivnosti bolesti. Međutim, kao i kod LTT metode i poremećaja imunoloških kompleksa, i ova metoda zahtijeva provjeru valjanosti. Cijena testa varira oko 170 PLN i Nacionalni zdravstveni fond ga ne nadoknađuje.

Ovdje možete pronaći više o testu CD57.

Berlioz - ELFA i CLIA test

U dijagnozi Lymeove bolesti primarno se koristi ELISA metoda (enzimski povezani imunosorbentni test). Međutim, mnogi laboratoriji koriste i druge serološke metode poput ELFA (enzimski povezani fluorescentni test) koji se provodi s Vidasom® i CLIA (kemiluminescentni imunološki test) izvedenim s analizatorom Liaison®.

Po čemu se razlikuju? Princip djelovanja triju metoda vrlo je sličan i koristi specifična antitijela i njihovu sposobnost vezanja na antigene. Metode ELFA i CLIA omogućuju automatizaciju analiza i brže provođenje testova u laboratoriju. Ove su metode također u stanju detektirati niže koncentracije antitijela u ispitivanom biološkom materijalu.

Što se tiče pouzdanosti rezultata dobivenih s tri metode, oni su gotovo isti. Pozitivni ili slabo pozitivni rezultati dobiveni ELFA i CLIA metodama, kao i za ELISA metodu, trebali bi biti potvrđeni Western blot analizom.

Vrijedno znati

Lajmska bolest - pregled krpelja uklonjenog s kože

Neki laboratoriji nude ispitivanje krpelja uklonjenog s kože na prisutnost borelijske DNA. Prema preporukama Radne skupine objavljenim 2014. godine, takva studija apsolutno nije dijagnostička metoda Lymeove bolesti.

Iako je rizik od prijenosa bakterija s krpelja na ljude proporcionalan vremenu sisanja krvi, prisutnost DNA spirohete u krpelju nije sinonim za infekciju, a njegova odsutnost ne isključuje infekciju.

Pristalice metode smatraju da je korisno donijeti odluku o uvođenju antibiotske terapije kod osoba sa simptomima koji ukazuju na Lymeovu bolest, ali bez prisutnosti migratornog eritema. Cijena takvih ispitanika varira između 100-500 PLN i Nacionalni zdravstveni fond ne vraća joj iznos.

Književnost

1. Laboratorijska dijagnostika bolesti koje se prenose krpeljima. Preporuke radne skupine: Nacionalna komora laboratorijskih dijagnostičara, Nacionalni institut za javno zdravstvo-Nacionalni institut za higijenu, Nacionalni savjetnik za područje zaraznih bolesti, Odjel za infektivne bolesti i neuroinfekcije, Medicinsko sveučilište u Białystoku, Poljsko društvo za virusologiju, Varšava 2014.
2. Rychlik U. i sur. Laboratorijska dijagnostika ispitivanja transformacije limfocita (LTT). Časopis za laboratorijsku dijagnostiku 2013, 49 (4); 425-428.
3. Marques A. R. Laboratorijska dijagnostika lajmske bolesti - napredak i izazovi. Infekt Dis Clin North Am. 2015; 29 (2): 295–307.
4. Marques A. i suradnici. Broj prirodnih stanica ubojica ne razlikuje se među pacijentima sa sindromom post-Lymeove bolesti i kontrolama. Clin Cjepivo Immunol. 2009; 16: 1249-1250.
5. Krzemień P. J. Važnost antigena Vlse / C6 kao markera u dijagnozi rane lajmske borelioze i proučavanju učinkovitosti njenog liječenja. Zdravstveni problemi civilizacije 2017; 11 (2): 87-92.
6. Miąskiewicz K. i suradnici: Prijedlog novog metodološkog pristupa i interpretacija rezultata antitijela protiv Borrelia burgdorferi - analiza sastava antitijela u cirkulirajućim imunološkim kompleksima. Reumatologija 2011; 49, 5: 328-334.
7. Muraczyńska B. i Gałęziowska E. Kontroverze povezane s dijagnozom i liječenjem Lajmske bolesti u svijetu. Opća medicina i zdravstvene znanosti, 2015 .; 21 (4): 372–377.

O autoru

Karolina Karabin, dr. Med., Molekularni biolog, laboratorijski dijagnostičar, Cambridge Diagnostics Polska Biolog sa specijalizacijom iz mikrobiologije i laboratorijski dijagnostičar s preko 10 godina iskustva u laboratorijskom radu. Diplomirao je na Fakultetu za molekularnu medicinu i član Poljskog društva za humanu genetiku, voditelj istraživačkih potpora u Laboratoriju za molekularnu dijagnostiku na Odjelu za hematologiju, onkologiju i unutarnje bolesti Medicinskog sveučilišta u Varšavi. Titulu doktora medicinskih znanosti iz područja medicinske biologije obranila je na 1. medicinskom fakultetu Medicinskog sveučilišta u Varšavi. Autor mnogih znanstvenih i popularno-znanstvenih djela iz područja laboratorijske dijagnostike, molekularne biologije i prehrane. Svakodnevno, kao specijalist u području laboratorijske dijagnostike, vodi glavni odjel Cambridge Diagnostics Polska i surađuje s timom dijetetičara na CD-u za prehranu. Svoje praktično znanje o dijagnostici i dijetoterapiji bolesti dijeli sa stručnjacima na konferencijama, treninzima te u časopisima i web stranicama. Posebno je zanima utjecaj suvremenog načina života na molekularne procese u tijelu.