Petak, 16. kolovoza 2013. - Španjolski istraživači identificirali su što bi mogao biti prvi biomarker povezan s rizikom od razvoja Alzheimerove bolesti (AD). Rezultati studije, objavljeni u časopisu Annals of Neurology, sugeriraju da je ovaj potencijal biomarkera prisutan u cerebrospinalnoj tekućini (CSF) barem desetljeće prije prvih znakova demencije.
"Ako naše početne rezultate mogu ponoviti drugi laboratoriji, oni će promijeniti način na koji trenutno razmišljamo o uzrocima Alzheimerove bolesti", kaže dr. Ramón Trullas, profesor istraživanja pri Visokom vijeću za znanstvena istraživanja (CSIC ) na Institutu za biomedicinska istraživanja u Barceloni i vodeći autor studije. Prema njegovom mišljenju, ovo bi otkriće moglo omogućiti traženje učinkovitijih tretmana u pretkliničkoj fazi.
Trenutno je jedini način točne dijagnoze bolesti postmortem neuropatološka analiza. Povezanost poznatih biomarkera s bolešću nejasna je, pa je gotovo nemoguće dijagnosticirati pretkliničke stadije s pravom sigurnošću.
Istraživači CSIC-a u svom radu pokazuju da smanjenje sadržaja mitohondrijske DNK (mtDNA) u CSF-u može biti predklinički pokazatelj Alzheimerove bolesti; a s druge strane da može postojati izravna uzročno-posljedična veza. Hipoteza je da smanjenje razine DNK u mitohondrijama u CSF-u odražava smanjenje sposobnosti mitohondrija da hrane moždane neurone, što uzrokuje njihovu smrt.
Pad koncentracije mtDNA prethodi nastanku dobro poznatih Alzheimerovih biokemijskih biomarkera (beta-amiloid 1-42, T-tau i p-tau proteini), što sugerira da je patofiziološki proces Alzheimerove bolesti Počinje ranije nego što se prije mislilo i da bi njegov gubitak u mtDNA mogao biti jedan od prvih prediktora bolesti.
Osim što omogućuje istraživanje moguće uzročne veze mtDNA i progresije Alzheimerove bolesti, upotreba mtDNA kao indeksa predkliničke Alzheimerove bolesti pruža važnu prednost u odnosu na prethodne biokemijske markere: otkrivanje ovog novog biomarker nukleinske kiseline Nedostaju mu tehničke poteškoće povezane s otkrivanjem proteina. MtDNA se lako može kvantificirati kvantitativnim ili realnim vremenom PCR (qPCR) ili 'Doplet Digital PCR' (ddPCR).
Prije ove studije, istraživači nisu izvijestili da se slobodne stanice koje cirkuliraju mtDNA mogu otkriti u ljudskom CSF-u. Međutim, pomoću ove studije, tim dr. Trullasa uspio je kvantitativno otkriti i reproducirati mtDNA koristeći qPCR, pažljivo optimiziran pridržavanjem MIQE smjernica.
Da bi potvrdili svoje rezultate qPCR-om, znanstvenici su koristili digitalni PCR sustav QX100 Droplet Digital PCR iz Bio-Rad Laboratories. Za razliku od qPCR analiza, QX100 sustav pruža apsolutnu kvantifikaciju ciljnih molekula DNA bez potrebe za standardnom krivuljom. Važan čimbenik za CSF analizu bio je da sustav 'Doplet Digital PCR' ne zahtijeva pročišćavanje uzorka da bi se uklonili PCR inhibitori, kao što je potrebno za qPCR analize.
"Doplet digitalni PCR" omogućio nam je validaciju početnih mjerenja qPCR-a, jer omogućuje apsolutno kvantifikaciju na razini jedne molekule bez oslanjanja na standardnu krivulju ", objašnjava Trullas. "Kako tehnologija postaje široko prihvaćena, predviđamo da će ddPCR biti budućnost detekcije mitohondrija DNA u cerebrospinalnoj tekućini", dodaje.
Trullas se nada da će drugi laboratoriji i bolnice uspješno ponoviti rezultate istraživanja njegove skupine, što bi potvrdilo da smanjene razine mtDNA trebaju biti ispitivane kao mogući uzrok Alzheimerove bolesti. Pronalazeći način kako blokirati ovu degeneraciju, liječnici će moći dijagnosticirati i liječiti Alzheimerovu bolest prije nego što se pojave simptomi.
Izvor:
Oznake:
Cut-And-Dijete ishrana Wellness
"Ako naše početne rezultate mogu ponoviti drugi laboratoriji, oni će promijeniti način na koji trenutno razmišljamo o uzrocima Alzheimerove bolesti", kaže dr. Ramón Trullas, profesor istraživanja pri Visokom vijeću za znanstvena istraživanja (CSIC ) na Institutu za biomedicinska istraživanja u Barceloni i vodeći autor studije. Prema njegovom mišljenju, ovo bi otkriće moglo omogućiti traženje učinkovitijih tretmana u pretkliničkoj fazi.
Trenutno je jedini način točne dijagnoze bolesti postmortem neuropatološka analiza. Povezanost poznatih biomarkera s bolešću nejasna je, pa je gotovo nemoguće dijagnosticirati pretkliničke stadije s pravom sigurnošću.
Istraživači CSIC-a u svom radu pokazuju da smanjenje sadržaja mitohondrijske DNK (mtDNA) u CSF-u može biti predklinički pokazatelj Alzheimerove bolesti; a s druge strane da može postojati izravna uzročno-posljedična veza. Hipoteza je da smanjenje razine DNK u mitohondrijama u CSF-u odražava smanjenje sposobnosti mitohondrija da hrane moždane neurone, što uzrokuje njihovu smrt.
Pad koncentracije mtDNA prethodi nastanku dobro poznatih Alzheimerovih biokemijskih biomarkera (beta-amiloid 1-42, T-tau i p-tau proteini), što sugerira da je patofiziološki proces Alzheimerove bolesti Počinje ranije nego što se prije mislilo i da bi njegov gubitak u mtDNA mogao biti jedan od prvih prediktora bolesti.
Osim što omogućuje istraživanje moguće uzročne veze mtDNA i progresije Alzheimerove bolesti, upotreba mtDNA kao indeksa predkliničke Alzheimerove bolesti pruža važnu prednost u odnosu na prethodne biokemijske markere: otkrivanje ovog novog biomarker nukleinske kiseline Nedostaju mu tehničke poteškoće povezane s otkrivanjem proteina. MtDNA se lako može kvantificirati kvantitativnim ili realnim vremenom PCR (qPCR) ili 'Doplet Digital PCR' (ddPCR).
Prije ove studije, istraživači nisu izvijestili da se slobodne stanice koje cirkuliraju mtDNA mogu otkriti u ljudskom CSF-u. Međutim, pomoću ove studije, tim dr. Trullasa uspio je kvantitativno otkriti i reproducirati mtDNA koristeći qPCR, pažljivo optimiziran pridržavanjem MIQE smjernica.
Apsolutna kvantifikacija ciljnih molekula
Da bi potvrdili svoje rezultate qPCR-om, znanstvenici su koristili digitalni PCR sustav QX100 Droplet Digital PCR iz Bio-Rad Laboratories. Za razliku od qPCR analiza, QX100 sustav pruža apsolutnu kvantifikaciju ciljnih molekula DNA bez potrebe za standardnom krivuljom. Važan čimbenik za CSF analizu bio je da sustav 'Doplet Digital PCR' ne zahtijeva pročišćavanje uzorka da bi se uklonili PCR inhibitori, kao što je potrebno za qPCR analize.
"Doplet digitalni PCR" omogućio nam je validaciju početnih mjerenja qPCR-a, jer omogućuje apsolutno kvantifikaciju na razini jedne molekule bez oslanjanja na standardnu krivulju ", objašnjava Trullas. "Kako tehnologija postaje široko prihvaćena, predviđamo da će ddPCR biti budućnost detekcije mitohondrija DNA u cerebrospinalnoj tekućini", dodaje.
Trullas se nada da će drugi laboratoriji i bolnice uspješno ponoviti rezultate istraživanja njegove skupine, što bi potvrdilo da smanjene razine mtDNA trebaju biti ispitivane kao mogući uzrok Alzheimerove bolesti. Pronalazeći način kako blokirati ovu degeneraciju, liječnici će moći dijagnosticirati i liječiti Alzheimerovu bolest prije nego što se pojave simptomi.
Izvor:
