Antinuklearna antitijela (ANA)

Antinuklearna antitijela dio su složenog dijagnostičkog procesa sistemskih bolesti vezivnog tkiva. Složeni mehanizam stvaranja antinuklearnih antitijela otežava interpretaciju njihovih rezultata, a prisutnost ili odsutnost pojedinačnih antitijela ne ukazuje uvijek na proces bolesti. Koje su vrste antinuklearnih antitijela? Kada treba obaviti test?

Sadržaj:

1. Antinuklearna antitijela - vrste
2. Antinuklearna antitijela - stvaranje i mehanizam djelovanja
3. Antinuklearna antitijela - indikacije za ispitivanje
4. Antinuklearna antitijela - što je test?
5. Antinuklearna antitijela - kako protumačiti rezultat?

Anti-nuklearna antitijela (ANA) su autoantitijela usmjerena protiv elemenata stanične jezgre, npr. DNA i citoplazme. Oni su jedno od najrazličitijih i najproučenijih antitijela.

Antinuklearna antitijela - vrste

• antitijela protiv nuklearnih antigena koji se mogu izvući (anti-ENA):
• protiv DNA topoizomeraze I (anti-Scl70)
• protiv ribonukleoproteina (anti-RNP)
• protiv Smith antigena (anti-Sm)
• anti-Mi2 / Mi-2
• anti-Ro (SS-A)
• anti-La
• anti-Jo1
• anti-PM-Scl
• anti-kn
• antitijela protiv nuklearnog proteina koji tvori pore gp-2010 (anti-gp-210)
• antitijela protiv nativne dvolančane DNA (anti-dsDNA)
• anti-centromerna antitijela (anti-ACA)

Antinuklearna antitijela - stvaranje i mehanizam djelovanja

Autoimunitet je abnormalan odgovor imunološkog sustava na vlastita tkiva, što rezultira pojavom autoimunih bolesti.

Opisani su različiti mehanizmi autoimunosti, od kojih je jedan oslobađanje antigena skrivenih od imunološkog sustava, npr. Kao rezultat upalnog oštećenja tkiva.

Tada se oslobađaju elementi koji se nalaze u staničnoj jezgri, npr. DNA, RNA, histoni, koje imunološki sustav počinje prepoznavati kao nešto strano i stvara protiv njih nuklearna antitijela.

Antinuklearna antitijela - indikacije za ispitivanje

• sumnja na bolesti vezivnog tkiva:
• sistemski eritematozni lupus (prisutnost antitijela u 95-100% bolesnika; antitijela protiv dsDNA specifični su biljeg bolesti)
• lupus izazvan lijekovima (95-100% bolesnika)
• antifosfolipidni sindrom (40-50% bolesnika)
• sistemska sklerodermija (80-95% bolesnika, posebno antitijela protiv Scl70)
• polimiozitis i dermatomiozitis (40-80% bolesnika, posebno antitijela protiv Jo1 i anti-Mi2)
• Sjögrenov sindrom (48-96% bolesnika, posebno antitijela protiv Ro i anti-La)
• reumatoidni artritis (oko 10% bolesnika)
• juvenilni idiopatski artritis (manje od 10% bolesnika)
• Raynaudov sindrom (20-60% bolesnika)
• fibromialgija (15-25% bolesnika)
• miješane bolesti vezivnog tkiva (95-100% bolesnika)
• procjena aktivnosti bolesti i praćenje učinkovitosti liječenja, npr. antitijela protiv dsDNA u sistemskom eritematoznom lupusu
• koreliranje prisutnosti antitijela s pojavom specifičnih simptoma bolesti, npr. Sjögrenov sindrom i prisutnost anti-Ro i anti-La antitijela
• predviđanje bolesti u budućnosti

Antinuklearna antitijela - što je test?

Krv uzeta iz savijenog lakta natašte koristi se za određivanje antinuklearnih antitijela.

Metode određivanja antitijela vrlo su različite i ovise o vrsti antinuklearnih antitijela koja se mjere. To su uglavnom imunološke metode kao što su:

• ELISA
• RIA
• neizravna imunofluorescencija
• metoda dvostruke imunodifuzije
• Western blot

U slučaju antinuklearnih antitijela, koristi se dvostupanjska dijagnoza. Prvo se provodi screening test neizravnom imunofluorescentnom metodom, koju karakterizira velika osjetljivost.

Metoda neizravne imunofluorescencije sastoji se u imobilizaciji HEp-2 stanica izvedenih iz ljudskih epitelnih stanica na staklu mikroskopa.

Stanice ove linije imaju u svojoj citoplazmi i staničnoj jezgri antigene koji vežu patološka antitijela iz pacijentove krvi.

Nakon dodavanja seruma pacijenta u čašu, antinuklearna antitijela vežu se za određene antigene i vidljiva su pod mikroskopom zahvaljujući posebnim fluorescentnim markerima.

Prednost neizravne imunofluorescencije je mogućnost razlikovanja vrsta antitijela na temelju vrste osvjetljenja fluorescentne boje.

Na primjer, sjaj jezgre homogenog tipa ukazuje na prisutnost anti-dsDNA ili anti-ssDNA antitijela.

Uvijek se mora potvrditi pozitivan rezultat probirnog testa. U tu svrhu koriste se vrlo specifične imunološke metode, npr. Western blot. Nakon otkrivanja prisutnosti i identifikacije vrste antinuklearnih antitijela, određuje se njegov titar, tj. Najveće razrjeđenje seruma pri kojem se može utvrditi prisutnost antitijela.

Antinuklearna antitijela - kako protumačiti rezultat?

Ispravan titar antinuklearnih antitijela trebao bi biti ispod 1:40.

Ako je probirni test za antinuklearna antitijela negativan i nema kliničkih simptoma koji ukazuju na sistemsku bolest vezivnog tkiva, dijagnoza se ne smije proširiti tako da uključuje specifična antitijela, npr. Anti-dsDNA, anti-Sm.

Smatra se da su klinički relevantni titri ≥ 1: 160 u odraslih i ≥ 1:40 u djece.

U slučaju pozitivnih rezultata, predlaže se rezultat ispitivanja tumačiti na sljedeći način:

• titar 1: 40-1: 80 - granični rezultat (slabo pozitivan), u nedostatku kliničkih simptoma bolesti vezivnog tkiva, ne preporučuje se ponavljanje testa ili provođenje naknadnog testa, jer se rezultati kod većine ljudi tijekom godina ne mijenjaju
• titar 1: 160-1: 640 - srednje pozitivan rezultat, u nedostatku kliničkih simptoma bolesti vezivnog tkiva, preporučuje se ponoviti test nakon 6 mjeseci
• titar ≥ 1: 1280 - visok pozitivan rezultat, u prisutnosti kliničkih simptoma bolesti vezivnog tkiva, potrebna je daljnja specijalistička dijagnoza za dijagnosticiranje bolesti

Treba imati na umu da je serološko ispitivanje antinuklearnih protutijela dio složenog dijagnostičkog postupka, a pozitivan rezultat uvijek se mora tumačiti u kontekstu kliničke slike i prisutnosti karakterističnih simptoma bolesti.

Antinuklearna antitijela s niskim titrom nalaze se u 5% zdrave populacije i njihova učestalost raste s godinama.

Uz to, njihova se prisutnost nalazi u fiziološkim i patofiziološkim uvjetima u kojima antinuklearna antitijela nemaju dijagnostički značaj:

• infekcije, npr. tuberkuloza, sifilis, malarija
• bolesti jetre, npr. ciroza jetre
• plućne bolesti npr. sarkoidoza, azbestoza
• karcinomi, npr. leukemija, limfom, rak dojke, melanom
• kožne bolesti, npr. psorijaza, lišaj planus
• nakon transplantacije organa, npr. transplantacije srca, transplantacije bubrega
• uporaba lijekova, npr. antiepileptika, hidralazina, litijevih soli,
• druge autoimune bolesti, npr. Hashimotova bolest, Addisonova bolest, dijabetes tipa I
• trudnoća (do 20% trudnica)

Vrijedno znati ...

Etničke varijacije karakteriziraju pojavu različitih vrsta antinuklearnih antitijela.

Primjerice, kavkaski bolesnici sa sistemskom sklerozom vjerojatnije imaju anti-ACA antitijela, a Afroamerikanci i Afrikanci vjerojatnije da imaju antitijela koja reagiraju na topoizomerazu.

Preporučeni članak:

Dijagnostički test ANA (antinuklearna antitijela)

Književnost

1. Fischer K. i sur. Autoantitijela u reumatološkoj praksi. Forum Reumatol. 2016, 2, 1, 39–50.
2. Unutarnje bolesti, ur. Szczeklik A., Medycyna Praktyczna Kraków 2010
3. Laboratorijska dijagnostika s elementima kliničke biokemije. Priručnik za studente medicine uredili Dembińska-Kieć A. i Naskalski J.W., Elsevier Urban & Partner Wydawnictwo Wrocław 2009, 3. izdanje

O autoru

Karolina Karabin, dr. Med., Molekularni biolog, laboratorijski dijagnostičar, Cambridge Diagnostics Polska Biolog sa specijalizacijom iz mikrobiologije i laboratorijski dijagnostičar s preko 10 godina iskustva u laboratorijskom radu. Diplomirao je na Fakultetu za molekularnu medicinu i član Poljskog društva za humanu genetiku, voditelj istraživačkih potpora u Laboratoriju za molekularnu dijagnostiku na Odjelu za hematologiju, onkologiju i unutarnje bolesti Medicinskog sveučilišta u Varšavi. Titulu doktora medicinskih znanosti iz područja medicinske biologije obranila je na 1. medicinskom fakultetu Medicinskog sveučilišta u Varšavi. Autor mnogih znanstvenih i popularno-znanstvenih djela iz područja laboratorijske dijagnostike, molekularne biologije i prehrane. Svakodnevno, kao specijalist u području laboratorijske dijagnostike, vodi glavni odjel Cambridge Diagnostics Polska i surađuje s timom dijetetičara na CD-u za prehranu. Svoje praktično znanje o dijagnostici i dijetoterapiji bolesti dijeli sa stručnjacima na konferencijama, treninzima te u časopisima i web stranicama. Posebno je zanima utjecaj suvremenog načina života na molekularne procese u tijelu.

Pročitajte više članaka ovog autora